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    發(fā)布日期:2025/8/26 13:55:00

    ELISA實(shí)驗(yàn)中,抗凝劑用于防止血液樣本凝固。抗凝劑對(duì)ELISA(酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定)的影響主要體現(xiàn)在對(duì)樣本處理和檢測(cè)結(jié)果的潛在干擾上。不同類型的抗凝劑可能會(huì)影響ELISA的準(zhǔn)確性,具體影響因素包括:

    1、抗凝劑類型對(duì)檢測(cè)結(jié)果的影響

    EDTA-K2抗凝劑:研究表明,使用EDTA-K2抗凝劑對(duì)抗-HIV、抗-HCV、HBsAg及抗-TP的檢測(cè)結(jié)果產(chǎn)生了較為明顯的干擾。例如,在一項(xiàng)研究中,采用EDTA-K2抗凝劑的樣本中,抗-HIV陽性檢出率為0.15%,抗-HCV陽性檢出率為1.29%,HBsAg陽性檢出率為1.61%,抗-TP陽性檢出率為0.15%1。這表明EDTA-K2抗凝劑可能對(duì)這些項(xiàng)目的檢測(cè)結(jié)果產(chǎn)生了一定程度的干擾。

    2、抗凝劑與試劑盒的兼容性

    不同的ELISA試劑盒可能對(duì)樣本中的抗凝劑有特定的要求。如果所使用的抗凝劑與試劑盒不兼容,可能會(huì)導(dǎo)致檢測(cè)結(jié)果的偏差。

    3、抗凝劑的選擇

    不同的抗凝劑如EDTA、肝素、檸檬酸鈉等,其化學(xué)性質(zhì)和作用機(jī)制不同。例如,EDTA通過螯合血液中的鈣離子來防止血液凝固,而肝素則通過增強(qiáng)抗凝血酶III的活性來阻止血液凝固。選擇不當(dāng)?shù)目鼓齽┛赡軙?huì)影響樣本的穩(wěn)定性,進(jìn)而影響ELISA的檢測(cè)結(jié)果。

    4、肝素鈉抗凝劑對(duì)ELISA檢測(cè)的影響

    酶活性抑制:肝素鈉可直接抑制ELISA系統(tǒng)中辣根過氧化物酶(HRP)的活性,導(dǎo)致顯色信號(hào)減弱,尤其在以HRP為標(biāo)記物的檢測(cè)中易出現(xiàn)假陰性。

    樣本適用性:在血液免疫四項(xiàng)(HBsAg、HCV-Ab、HIV-Ab、TP)檢測(cè)中,肝素鈉抗凝標(biāo)本的反應(yīng)性檢出率顯著低于EDTA-K?,但需注意其對(duì)酶促反應(yīng)的普遍抑制作用

    5、抗凝劑對(duì)樣本處理的影響

    樣本保存與處理:采供血機(jī)構(gòu)應(yīng)避免對(duì)含CPD保養(yǎng)液的標(biāo)本進(jìn)行ELISA法檢測(cè),以提高TP檢出率,確保輸血安全。此外,為了防止陽性標(biāo)本的漏檢,建議血袋生產(chǎn)廠家延長針頭與血袋連接處的血液管道的長度,使其不僅能滿足檢測(cè)留樣的要求,還能滿足保存留樣的要求。

    綜上所述,抗凝劑的選擇對(duì)ELISA實(shí)驗(yàn)的結(jié)果有著顯著的影響。為了確保ELISA檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性,選擇合適的抗凝劑并遵循正確的樣本處理步驟至關(guān)重要。

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